Molecular identification and genotyping of Streptococcus mutans from saliva samples of children in Medellin, Colombia / Identificación molecular y genotipificación de Streptococcus mutansde muestras de saliva de niños de Medellín, Colombia

Abstract Introduction and objective: Tooth decay is one of the most prevalent infectious diseases of the oral cavity. The aim of this study was to determine the prevalence of Streptoccocus mutans and its genotypes in saliva samples from 6 and 7 year old children with and without dental caries. Materials and methods: Forty seven saliva samples were obtained from 6-7 year-old children, randomly selected from a Public School in Medellin, Colombia. Oral examinations in order to determine the DMF-T Index (Decay, Missing and Filling Teeth) were carried out. Isolates were identified by the Streptoccocus sobrinus and Streptococcus mutans PCR, API 20STREP and 16S rRNA sequence analysis. Genotypes c, e, f and k were detected by PCR. Results: Prevalence of S. mutanswas 14.9%. Of the 47 saliva samples, 57.4% (27) corresponded to children with dental caries, and 8.5% (4) were positive for S. mutans genotype c, 2.1% (1 each) genotype f genotype k, and genotype cand k, respectively. Conclusion: Prevalence of S. mutanswas lower than in previous studies of Colombian children with similar demographic characteristics. Streptoccocusmutans'genotype c, fand kwere found in children with caries but not in the group without caries. This is the first report of S. mutans genotype kin Colombia; this genotype requires further study to clarify its relation with dental caries and cardiovascular disease in Colombia.

Resumen Introducción y objetivo: La caries dental es una de las enfermedades infecciosas de la cavidad oral más comunes en el mundo. El objetivo de este estudio fue determinar la prevalencia de Streptococcus mutansy sus genotipos en muestras de saliva de niños de 6 y 7 años, con y sin caries dental. Materiales y métodos: Cuarenta y siete (47) muestras de saliva fueron obtenidas de niños de 6-7 años, seleccionados aleatoriamente de una escuela pública en Medellín, Colombia. Se realizaron evaluaciones orales para determinar el índice COP-D (número de dientes permanentes cariados, obturados y perdidos). Los aislamientos fueron identificados mediante PCR para diferenciación de S. sobrinusy S. mutans, API-20STREP y análisis de ARNr 16S. Se determinaron mediante PCR los genotipos c e, fy ken las cepas identificadas como S. mutans. Resultados: La prevalencia de S. mutansfue 14,9%. De las 47 muestras de saliva, 57,4% (27) correspondieron a niños con caries dental, y 8,5 % (4), fueron positivas para S. mutans genotipo c, 2,1 % (1 cada una) genotipo f genotipo ky genotipo cy k, respectivamente. Conclusión: La prevalencia de S. mutansfue menor que la reportada en estudios previos de niños colombianos con características demográficas similares. Se encontró presencia de genotipos c, fy kde S. mutansen niños con caries dental, pero no en el grupo de niños sin caries dental. Este es el primer estudio en reportar la presencia del genotipo ken Colombia. Es necesario realizar más investigaciones en nuestro país para aclarar la relación de S. mutans genotipo k con caries dental y enfermedad cardiovascular.

Características fisicoquímicas y microbiológicas de la saliva durante y después del embarazo / The physicochemical and microbiological characteristics of saliva during and after pregnancy

Objetivo Identificar las variaciones producidas en algunos parámetros fisicoquímicos y microbiológicos de la saliva en un grupo de mujeres durante y después de la gestación. Materiales y Métodos Se recolectó saliva total estimulada en una cohorte de 35 mujeres embarazadas y después del parto. A cada muestra le fueron determinadas características fisicoquímicas (tasa de secreción, pH y capacidad amortiguadora) y microbiológicas (recuentos de bacterias acidogénicas). Resultados El pH y la capacidad amortiguadora de la saliva durante el embarazo fueron más bajos que en el posparto, mientras que la tasa de secreción salival fue más alta en el embarazo. Los recuentos de S. mutans y Lactobacillus spp. no presentaron cambios significativos estadísticamente, pero se observa una tendencia al aumento en los recuentos durante la gestación. Conclusión Los cambios ocurridos en la saliva de las gestantes pueden llevar a un aumento del riesgo de aparición de enfermedades bucales como caries, gingivitis y enfermedad periodontal, los cuales podrían disminuirse, mediante un adecuado diagnóstico y seguimiento odontológico, que incluya educación en salud oral a la gestante.

Objectives Identify the changes in some physiological and microbiological parameters in the saliva from a group of women during and after their pregnancies. Methods Stimulated whole saliva was collected from a cohort of 35 women during their pregnancy and afterwards to determine each sample's physicochemical (secretion rate, pH and buffer capacity) and microbiological characteristics (acidogenic bacteria count). Results The pH and buffer capacity of saliva during pregnancy were lower than after pregnancy. There were no statistically significant changes regarding S. mutans and Lactobacillus spp. count, but a tendency towards increased values during pregnancy was noted. Conclusions Changes occurring in the saliva of pregnant women can lead to an increase of risk of suffering disease affecting one's oral health, such as caries, gingivitis and periodontal disease; this could be prevented by appropriate diagnosis and dental follow-up, including education regarding pregnant women's oral health.

Physicochemical salivary properties, Lactobacillus, Mutans Streptococci counts and early childhood caries in preschool children of Colombia

Dental caries is a multifactorial disease, in which saliva has an important role. Saliva properties affect the growth of cariogenic microorganisms, so variations below threshold levels are considered risk factors for the development of dental caries. Salivary tests and microbiological counts of cariogenic bacteria are often used for clinical purposes in order to reveal problems that could explain caries development and have been evaluated in multiple studies, but these studies have mainly been carried out on adults. Thus, the aim of this study was to identify physicochemical salivary properties, mutans streptococci and Lactobacillus counts among preschool children, and their relationship with ECC in a cross-sectional study in Medellin, Colombia. Caries was determined using ICDAS criteria for a sample of 201 preschool children. Stimulated saliva samples were processed for bacterial detection, mean flow rate, pH and buffer capacity calculation. Risk variables for ECC were assessed individually and adjusted using a binary logistic regression model. The results showed that 71.14% of study subjects had ECC. Flow rate, final pH and Buffer capacity increased with age, but none of them were related to the presence of ECC. Although OR analysis detected correlations between ECC, gender, age, dental eruption stage and Lactobacillus presence, binary logistic regression analysis only showed gender and Lactobacillus as strongly associated with ECC. It can be concluded that gender and Lactobacillus presence are key variables for the presence of ECC in these children; whilst age and dental eruption stage play a minor role. Further studies are required to clarify the role of mutans streptococci counts in this population and to establish normal salivary parameters as well as threshold levels for hyposalivation in preschool children, as results showed differences with normal parameters used for adults.

La caries dental es una enfermedad multifactorial en la cual la saliva tiene un impacto importante. Las propiedades de la saliva afectan el crecimiento de microorganismos cariogenicos y por lo tanto las variaciones por debajo de los niveles umbral son consideradas factor de riesgo para el desarrollo de caries. Las pruebas salivares y los recuentos de microorganismos cariogenicos son utilizadas con frecuencia en la clinica para identificar factores que puedan explicar el desarrollo de lesiones cariosas y han sido evaluados en multiples estudios, pero estos han sido desarrollados principalmente en adultos. El objetivo de este trabajo fue identificar propiedades fisicoquimicas de la saliva y recuentos de estreptococos del grupo mutans y Lactobacillus, en relacion con la Caries de la Infancia Temprana (CIT). Para esto, se realizo un estudio descriptivo transversal. Se registraron las lesiones de caries dental con el sistema ICDAS en 201 ninos pre-escolares de hogares infantiles de estrato socioeconomico medio-bajo. Se obtuvieron muestras de saliva estimulada, que fueron procesadas para detectar estreptococos del grupo mutans y Lactobacillus; se calculo la tasa de secrecion salivar, pH y capacidad Buffer. Se analizaron posibles variables indicadoras de riesgo para CIT, mediante el calculo de OR individuales por variable y OR ajustadas mediante un modelo de regresion logistica binario. Los resultados indicaron que el 71.14% de los ninos presentaban CIT. Las propiedades de la saliva mostraron un mejor comportamiento con la edad, con valores diferentes a los parametros definidos para poblaciones adultas, pero ninguna tuvo relacion con la enfermedad. El genero y la presencia de Lactobacillus mostraron asociacion fuerte en el analisis de regresion sugiriendolos como principales indicadores de riesgo para CIT en esta poblacion. Se requieren estudios prospectivos y analizar variaciones biologicas, para clarificar el papel de los estreptococos del grupo mutans y revisar los valores umbral para la evaluacion de la secrecion salivar en preescolares.